Labiausiai linkę į HPLC gedimus ir sprendimus

Kaip didelio tikslumo prietaisas, HPLC gali lengvai sukelti tam tikrų varginančių nedidelių problemų, jei jis naudojamas netinkamai.Viena iš dažniausiai pasitaikančių problemų yra stulpelio suspaudimo problema.Kaip greitai pašalinti sugedusį chromatografą.HPLC sistemą daugiausia sudaro rezervuaro butelis, siurblys, purkštukas, kolonėlė, kolonėlės temperatūros kamera, detektorius ir duomenų apdorojimo sistema.Visoje sistemoje stulpai, siurbliai ir detektoriai yra pagrindiniai komponentai ir pagrindinės vietos, kuriose gali kilti problemų.

Kolonėlės slėgio raktas yra sritis, kurią reikia atidžiai stebėti naudojant HPLC.Kolonėlės slėgio stabilumas yra glaudžiai susijęs su chromatografinės smailės forma, kolonėlės efektyvumu, atskyrimo efektyvumu ir sulaikymo trukme.Kolonėlės slėgio stabilumas nereiškia, kad slėgio vertė yra stabili esant stabiliai vertei, o tai, kad slėgio svyravimų diapazonas yra tarp 345 kPa arba 50 PSI (leidžiama naudoti gradiento eliuavimą, kai kolonėlės slėgis yra stabilus ir lėtai kinta).Per didelis arba per žemas slėgis yra kolonėlės slėgio problema.

Labiausiai linkę į HPLC gedimus ir sprendimus

1, aukštas slėgis yra dažniausia HPLC naudojimo problema.Tai reiškia staigų slėgio padidėjimą.Apskritai, yra šios priežastys: (1) Paprastai taip yra dėl srauto kanalo užsikimšimo.Šiuo metu turėtume tai išnagrinėti dalimis.a.Pirmiausia nupjaukite vakuuminio siurblio įvadą.Šiuo metu PEEK vamzdelis buvo užpildytas skysčiu, kad PEEK vamzdelis būtų mažesnis nei tirpiklio buteliukas, kad būtų galima pamatyti, ar skystis lašėjo savo nuožiūra.Jei skystis nelaša arba laša lėtai, tirpiklio filtro galvutė užsikimšusi.Gydymas: pusvalandį pamirkykite 30% azoto rūgštyje ir nuplaukite itin grynu vandeniu.Jei skystis laša atsitiktinai, tirpiklio filtro galvutė yra normali ir tikrinama;b.Atidarykite Valymo vožtuvą, kad mobilioji fazė nepraeitų per kolonėlę, o jei slėgis labai nesumažėja, užsikemša balta filtro galvutė.Gydymas: Filtruoti balti spuogai buvo pašalinti ir pusvalandį apdoroti ultragarsu 10% izopropanoliu.Darant prielaidą, kad slėgis nukrenta žemiau 100 PSI, filtruojama balta galvutė yra normali ir yra tikrinama;c.Nuimkite kolonėlės išeinamąjį galą, jei slėgis nesumažėja, kolonėlė užblokuojama.Gydymas: jei tai buferinės druskos užsikimšimas, skalaukite 95%, kol slėgis taps normalus.Jei kliūtį sukelia kokia nors labiau išsilaikiusi medžiaga, norint pasiekti normalų slėgį, reikia naudoti stipresnį srautą nei dabartinė judrioji fazė.Jei ilgalaikio valymo slėgis pagal aukščiau pateiktą metodą nesumažėja, galima laikyti, kad kolonėlės įvadas ir išėjimas yra prijungti prie prietaiso, priešingai, o kolonėlę galima valyti mobiliąja faze.Šiuo metu, jei kolonėlės slėgis vis dar nesumažėjęs, kolonėlės įėjimo sieto plokštę galima pakeisti tik, bet kai operacija nėra gera, nesunku sumažinti kolonėlės efektą, todėl stenkitės naudoti mažiau.Esant sudėtingoms problemoms, galima apsvarstyti galimybę pakeisti kolonėlę.

(2) Neteisingas srauto greičio nustatymas: teisingą srautą galima nustatyti iš naujo.

(3) Neteisingas srauto santykis: skirtingų srautų proporcijų klampos indeksas skiriasi, o atitinkamas didesnio klampumo srauto sistemos slėgis taip pat yra didesnis.Jei įmanoma, mažesnio klampumo tirpiklius galima pakeisti arba iš naujo nustatyti ir paruošti.

(4) Sistemos slėgio nulio poslinkis: sureguliuokite skysčio lygio jutiklio nulį.

2, slėgis per žemas (1) dažniausiai atsiranda dėl sistemos nuotėkio.Ką daryti: suraskite kiekvieną jungtį, ypač sąsają abiejuose kolonėlės galuose, ir priveržkite nuotėkio vietą.Nuimkite stulpelį ir atitinkama jėga priveržkite arba išklokite PTFE plėvelę.

(2) Dujos patenka į siurblį, tačiau slėgis šiuo metu paprastai yra nestabilus, aukštas ir žemas.Kalbant rimčiau, siurblys negalės sugerti skysčio.Apdorojimo būdas: atidarykite valymo vožtuvą ir valykite 3–5 ml/min srauto greičiu.Jei ne, oro burbuliukai buvo išsiurbti iš išmetimo vožtuvo naudojant tam skirtą adatinį vamzdelį.

(3) Nenuteka judriosios fazės: patikrinkite, ar rezervuaro butelyje yra judriosios fazės, ar kriauklė panardinta į judriąją fazę ir ar veikia siurblys.

(4) Atskaitos vožtuvas neuždarytas: atskaitos vožtuvas uždaromas po lėtėjimo.Paprastai jis sumažėja iki 0,1.~ 0,2 ml/min uždarius etaloninį vožtuvą.

Santrauka:

Šiame darbe analizuojamos tik įprastos skysčių chromatografijos problemos.Žinoma, praktiškai taikydami susidursime su daugiau kitų problemų.Valydami gedimus turėtume vadovautis šiais principais: vienu metu keisti tik vieną veiksnį, kad būtų nustatytas ryšys tarp hipotetinio veiksnio ir problemos;Paprastai, keisdami dalis trikčių šalinimui, turėtume atkreipti dėmesį į tai, kad išmontuotos nepažeistos dalys būtų grąžintos į vietą, kad būtų išvengta atliekų;Gero įrašymo įpročio formavimas yra raktas į gedimų valdymo sėkmę.Apibendrinant, naudojant HPLC, svarbu atkreipti dėmesį į pirminį mėginių apdorojimą ir tinkamą įrangos veikimą bei priežiūrą.